藥物敏感試驗如何做?

General 更新 2024-12-18

如何做藥敏試驗

用藥敏實驗進行藥物敏感度的測定,以便準確有效的利用藥物進行治療。但由於藥敏試驗要求比較嚴格,條件比較高,僅僅在大中專院校或科研單位有條件的可以操作,一些養殖廠或一些門診難有條件進行藥敏試驗的操作。針對這個問題,農業部動物檢疫所青島易邦生物工程有限公司動物疫病診療中心經過幾年的總結和實踐,逐漸總結出幾套適合基層進行藥敏試驗的操作方法。目前,臨床微生物實驗室進行藥敏試驗的方法主要有紙片擴散法,稀釋法(包括瓊脂和肉湯稀釋法),抗生素濃度梯度法(E-test法),和自動化儀器等。

紙片擴散法

該法是將含有定量抗菌藥物的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上,紙片中的藥物在瓊脂中擴散,隨著擴散距離的增加,抗菌藥物的濃度呈對數減少,從而在紙片的周圍形成濃度梯度。同時,紙片周圍抑菌濃度範圍內的菌株不能生長,而抑菌範圍外的菌株則可以生長,從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈,不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑因受藥物在瓊脂中擴散速度的影響而可能不同,抑菌圈的大小可以反映測試菌對藥物的敏感程度,並與該藥物對測試菌的MIC呈負相關。

稀釋法

稀釋法藥敏試驗可用於定量測試抗菌藥物對某一細菌的體外活性,分為瓊脂稀釋法和肉湯稀釋法。實驗時,抗菌藥物的濃度通常經過倍比(lg2)稀釋,能抑制待測菌肉眼可見生長的最低藥物濃度成為最小抑菌濃度(MIC),一個特定抗菌藥物的測試濃度範圍應該包含能夠檢測細菌的解釋性折點(敏感、中介和耐藥)的濃度,同時也應該包含質控參考菌株的MIC.

什麼是進行藥物敏感試驗的基礎

1 概述

測定細菌在體外抗菌藥物敏感性(以下稱藥敏試驗)的試驗方法很多。絕大多數臨床實驗室以瓊脂擴散法作為常規方法測定常見的快速生長的病原菌。本文介紹的是標準紙片擴散法。本文提出的一系列建議有助於藥敏試驗的標準化。具體地敘述了現行推薦方法的操作步驟,及其適應性和侷限性。本文還重溫了國際協作研究會(ICS)的有關建議和食品藥物管理局(FDA)的有關規定,並採納了其中的有關章節。

只根據是否出現抑菌環而不考慮其大小來判斷細菌對抗菌藥物敏感性的試驗方法,結果是不準確的。紙片擴散法試驗必須遵循標準的方法學原理,並根據抑菌環與最低抑菌濃度的相關性,並結合臨床上已知敏感或耐藥菌株的狀況進行標準化,結果才能可靠。

要得到可靠結果,必須嚴格地按照本文的方法進行操作。美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)下設的紙片擴散法藥敏試驗分委員會推薦的標準方法,以Bauer等介紹的方法為基礎,是目前敘述最完整的試驗方法。其中的解釋標準是綜合臨床和實驗室的數據發展而來,並得到證實。

本文介紹的是現行紙片擴散法藥敏試驗的操作、質量控制以及解釋標準。當發現新問題並有所改進時,將併入新版本,以非正式文件補充發布。

紙片法抗菌藥物敏感實驗操作標準

2 做藥敏試驗的指證

任何細菌引起的感染均需要治療。如果依細菌的種類不能預知其敏感性,就應做藥敏試驗。通常,鑑定和藥敏試驗是同時進行的。當致病菌屬於一種對一般常用抗菌藥物耐藥的細菌,最需要做藥敏試驗。細菌耐藥機制包括:產生滅活藥物的酶,藥物耙位改變,或藥物進入細胞的方式發生變化。有些細菌的抗菌藥物敏感性可以預知。當感染由一種對某高效抗菌藥物敏感的細菌引起時,就不必做藥敏試驗(如,化膿性鏈球菌對青黴素專性敏感)。但對青黴素過敏的病人,分離出的化膿性鏈球菌也許要測一下紅黴素和四環素的敏感性,以便發現有無耐藥性。細菌耐藥性流行病學研究及新抗菌藥物的研究也需要做藥敏試驗。

做藥敏試驗,應從分離平板上挑選各種疑為致病菌的單個菌落,同時做菌種鑑定。不同菌種不可在同一平板上做混合細菌藥敏試驗。一般避免用臨床標本(如無菌體液和尿液)直接做藥敏,除非臨床上急需且革蘭氏染色只見到單一菌種,但隨後應再以標準方法重做。對感染性質不同,標本中混有渾濁細菌或正常菌群的情況,其中的細菌也許與感染治療關係不大,常不必做藥敏,不然反會招致錯誤的引導。

3 常規測定藥物的選擇

要測定和報告給哪些藥物,須與感染科醫生、醫院的藥品委員會及感染控制委員會協商,然後由實驗室制定最合適的方案。表1和表1A列出了治療各類細菌感染有效的藥物,其體外藥敏試驗結果也有助於感染的控制及流行病學研究。

3.1 常規報告

表1和表1A列出的抗菌藥物是我們目前認為比較適合的。選藥時做了多方面考慮,包括微生物學、臨床藥理學因素及美國FDA認可的臨床適用性和療效。

為了避免誤導,給臨床醫生的報告應只包括治療上有用的藥物,如表1和表1A。根據情況需要,可在此基礎上增減。為了積累分類學和流行病學資料也可選擇用於治療以外的藥物,但結果僅限於實驗室內的感染控制醫生或醫院感染流行學專家用,不可報給臨床醫生。

3.2 使用認可的名稱

所有抗菌藥物均採用官方認可的名稱以避免混淆。為了強調大多數現用抗生素之間的關係,按藥物的種類分組如下:

3.2.1 β-內酰胺類 所有β-內酰胺類藥物都具有相同的中央β-內酰胺環結構,並以抑制細胞壁合成為主要作用機理。β-內酰胺環上的取代環結構或取代基決定了藥物屬於青黴素類、頭孢烯類、碳頭孢烯類、碳......

藥敏試驗的具體操作方法

1藥敏實驗操作步驟:在超潔淨工作臺內,先將滅菌好的培養基做好標記,無菌取病料(即:肝臟、心臟組織)一小塊,輕輕在滅菌的培養基上塗布幾下(不要突破培養基),然後用接種環再密集劃線。然後,將製備好的藥敏片分別按標記好的位置貼在培養基的表面。記錄好培養皿的標記及藥敏片的順序。最後,將培養皿放入37℃恆溫箱中培養8—12小時即可。

2藥敏實驗結果觀察:培養好後會發現細菌再培養基上均勻分佈,同時會看到藥敏片周圍有不同程度的抑菌圈。抑菌圈越大,說明該雞群對這種藥物越敏感;抑菌圈小或沒有抑菌圈,說明該雞群對這種藥物不敏感或已經產生了耐藥性。若在培養皿中出現一團一團的細菌時說明培養皿中有雜菌感染。

藥敏實驗是什麼?怎麼做

用藥敏實驗進行藥物敏感度的測定,以便準確有效的利用藥物進行治療。但由於藥敏試驗要求比較嚴格,條件比較高,僅僅在大中專院校或科研單位有條件的可以操作,一些養殖廠或一些門診難有條件進行藥敏試驗的操作。針對這個問題,農業部動物檢疫所青島易邦生物工程有限公司動物疫病診療中心經過幾年的總結和實踐,逐漸總結出幾套適合基層進行藥敏試驗的操作方法。目前,臨床微生物實驗室進行藥敏試驗的方法主要有紙片擴散法,稀釋法(包括瓊脂和肉湯稀釋法),抗生素濃度梯度法(E-test法),和自動化儀器等。

做一個支原體的藥敏實驗,怎麼做?用啥做?

你算是問著了,我是醫院的人員,這個問題我幫你解答吧。S就是敏感I就是中敏(中度敏感)R就是耐藥。明白了這個意思以後你自己就可以看懂了吧?也就是說你用S類的藥效果會很好,你身體對這種藥有效明白嗎?I就是次於S一點。R對於你已經不管用了,你的身體已經習慣了這種藥,它對你的病是最不理想的。這個解脲支原體呢不要想的那麼可怕,但是大夫一定會說的很可怕並且會告訴你如果想要孩子一定更好治好它,因為它會導致胎兒死胎滑胎或者畸形,如果不這麼說你怎麼會掏錢呢對吧?這麼告訴你吧,如果你身體無明顯症狀這個病可以不治的,但是如果你有婦科病,比如:陰道炎、黴菌性陰道炎、細菌性陰道病.等等,也許會因為這個支原體不易治癒。如果你想治的話不要去小門診小門臉的醫院,不要有病亂投醫。不要去現代女子醫院,收費貴的嚇人。一般的醫院治療方式是輸液、沖洗上藥外加一個微波治療。時間是2個星期,每次的治療時間為30分鐘。這是女性的治療方法,男性就容易多了,只需要吃藥就可以治好的。不過他也得做個檢查先看看是否也感染了支原體然後也做個藥敏看看他對哪種藥敏感再對症下藥。不知道你是什麼時候檢查出支原體的,你檢查完的半個月再讓你愛人去檢查,因為男性會呈假陰性,時間短有可能查不出來,多數男性體抗力都好也許就查不出來。如果想知道的再詳細點給我留言吧

藥敏試驗怎麼做

皮試

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