裂解細胞是什麼意思?
General 更新 2024-11-21
測量細胞內ros 用裂解細胞嗎
建議直接購買SIGMA的DCFH-DA,380元左右吧,熒光效果相當好。
我們同一實驗分別採用了碧雲天的試劑盒和SIGMA的DCFH-DA粉劑,結果碧雲天的熒光弱,而且組間無差別,用sigma的粉劑自己配置DCFH-DA溶液,一次出結果。有時圖便宜反而更費錢啊。
SIGMA的DCFH-DA粉劑建議合買,一個人根本用不完。
取所需分量(夠自己實驗用的)直接用無血清培養基溶解即可,勿需任何溶媒處理,溶解性非常好。短期可4度保存。
我實驗中是長期刺激細胞(10h),所以干預後才裝載探針,終濃度10uM或20uM都可。貼壁狀態下直接裝載,避光孵育30min,PBS洗2遍,消化至懸,上流式檢測。熒光強度與細胞內活性氧水平成正比。
為什麼細胞裂解後還有很多粘稠狀物質
RIPA裂解細胞後的粘稠物質主要是DNA,10000g以上離心五分鐘就可以沉澱, 取上清液。如果一次離心後還有粘稠可重複一次。
trizol裂解細胞時間過長對rna有影響麼
沒記錯的話trizol說明書說加完trizol裂解的細胞勻漿可在室溫放置數小時。
如果冷凍在-80攝氏度則我覺得幾個月也沒任何問題。