離體心臟灌流是研究心臟功能的重要手段之一，廣泛應用於醫學、生物學、藥學等教學和科研工作中。採用離體心臟灌流系統可以直觀地觀察心臟的活動,研究心臟舒縮功能,心率和節律變化,前後負荷及各種體液因素等對心臟功能的影響 。採用蛙心臟進行離體心臟灌流是較為常用的一種模型,因其穩定,經濟,一直被人們廣泛採用。進行離體心臟灌流實驗,首先需要保證心臟在體外較長時間存活,然後根據實驗目的進行灌流和施加實驗因素。無論是心臟離體前的插管、血流沖洗等操作,還是心臟離體後用人工溶液代替血液進行灌流,均使心臟脫離了生理性神經體液環境。因此,使離體心臟較長時間存活,並維持良好的狀態對於完成實驗和取得可靠實驗資料極為重要。
工具/原料
D95-微機化生理藥理學實驗教學系統，張力換能器，蛙心夾，木質試管夾，鐵架臺，雙凹夾，蛙心插管，蛙類手術器械，滴管，線
任氏液，0.65%NaCl，1%CaCl2，1%KCl，1：10000腎上腺素溶液，1：10000乙醯膽鹼溶液
蛙或蟾蜍
步驟/方法
離體蟾蜍心臟的製備
(1)取一蟾蜍毀其腦和脊髓，仰位固定於蛙板上，暴露心臟的方法同實驗9。
(2)心臟插管 分支前的主動脈下穿一線並打一鬆結備用 ，左側主動脈穿一根線並結紮之，用左手提起結紮線，右手用眼科剪在左側主動脈距分叉部3mm處剪一“V”型口。將盛有少量任氏 液的蛙心套管(用拇指將套管堵住，以防套管中的任氏液流出)從“V”型口插入動脈球底部，然後稍後撤套管，再轉向心室中央方向插入，可見液麵隨心搏升降即可。將分支前主動脈下的鬆結紮緊，並固定在套管的小突上。小心提起套管和心臟，剪斷主動脈左右分支；結紮與靜脈竇相連的後腔靜脈，並在結紮線以下剪斷，將心臟摘出。
(3)用鐵支柱上的試管夾夾住套管、蛙心夾夾住蟾蜍的心尖。將蛙心夾的線與萬能槓桿相連，(蛙心夾與換能器和二道儀連線亦可)，描筆尖上與記紋鼓面接觸即可觀察(圖6－11－1)。
觀察專案
(1)開動慢鼓描計一段正常心搏曲線，注意觀察心跳頻率和強度以及心臟的收縮、舒張程度。
(2)把蛙心套管內任氏液全部換為0.65%NaCl溶液，觀察心跳變化。
(3)把0.65%NaCl溶液吸出，換以任氏液，加入3%CaCl2溶液1～2滴，觀察心跳變化。
(4)把含3%CaCl2的溶液吸出，換以任氏液，加入1%KCl溶液1～2滴，觀察心跳變化。
(5)把含KCl的溶液吸出，換以任氏液，加入0.01%腎上腺素溶液2～3滴，觀察心跳變化。
(6)把含腎上腺素的溶液吸出，換以任氏液，加入0.01%乙醯膽鹼溶液1～2滴，觀察心跳變化。
(7)把含乙醯膽鹼的溶液吸出，換以任氏液，加入3%乳酸溶液1～2滴，觀察心跳變化。待心跳變化明顯時，立即加入2.5%NaHCO3溶液1～2滴，觀察心跳逐步恢復。注意事項
避免過度牽拉靜脈竇，否則離體後的心臟可能出現搏動異常；
注意保留靜脈竇的完整性，為防止誤傷靜脈竇，剪取心臟時可將剪尖朝下進行剪下；
蛙心離體後若搏動不良，蛙心管內液麵不波動，多為固定線牽拉過緊所致，可用眼科鑷夾住紮線處稍稍向下移動蛙心即可；
注意常用任氏液溼潤蛙心表面。