怎樣配製HA-HI試驗用四單位抗原?

HA-HI試驗是測定血清抗體滴度的常規方法“”，試驗的原理是抗原抗體中和反應，是動物醫學專業必須掌握的試驗技能。那麼，在這個試驗中非常關鍵的一步就是配製四單位病毒抗原，那麼如何正確的操作呢？下面是小編總結的一些試驗過程和注意事項，供需要的朋友參考。

工具/原料

PBS緩衝液、1%雞紅細胞、單道和多道移液器及吸頭、20ml青瓶及塞子、96孔微量血凝板等

方法/步驟

為什麼要用四單位病毒

經過大量的試驗數據顯示，只有四單位的病毒抗原濃度才能最好的反應血清抗體的水平，四單位是人為規定的。

試驗前準備

準備好配製四單位抗原所需的所有材料，包括病毒抗原、PBS緩衝液、1%雞紅細胞、單道和多道移液器及吸頭、20ml青瓶及塞子、96孔微量血凝板等。

測定病毒的血凝滴度（HA試驗）

如何測定病毒的血凝滴度，詳見本小編的“”“血凝（HA）試驗操作攻略”一文。

假設測得的血凝滴度為2的8次方，則四單位病毒的稀釋倍數為2的6次方（2的8次方除以4），即64倍稀釋。

計算抗原用量

根據所需的四單位抗原的總量來確定抗原液的用量。

比如，需四單位抗原總量為20ml，則利用公式：抗原原液*64（稀釋倍數）=20ml，求出抗原原液的體積為0.312ml，需要PBS緩衝液的體積約19.7ml，根據計算的結果配置即可。

配製四單位抗原

取PBS緩衝液19.7ml，加入20ml的小青瓶中，取0.312ml的病毒抗原液，加入到緩衝液中，蓋上塞子，充分混勻，最好用渦旋儀混勻，至此，四單位抗原配製完成。

使用

四單位抗原是進行HI試驗必須的，使用前還要進行四單位的驗證，驗證成功後就可以用了。

注意事項

配置的四單位抗原儘量比需要的體積多一些，以防不夠用。

四單位抗原最好現配現用，以保證抗原的穩定性。

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