新城疫是雞群常發的一種病毒性疾病,病原為NDV。預防新城疫的方法,可以接種病毒性疫苗,也可以接種高免卵黃抗體,前者為主動免疫,後者為被動免疫,效果都不錯。那麼,如何自制高免卵黃抗體呢?下面是小編總結的經驗。
工具/原料
500ml鹽水瓶、250ml疫苗瓶、50ml離心管、4℃離心機等
方法/步驟
獲取高免蛋
種雞場或蛋雞場處於產蛋高峰期的雞蛋卵黃抗體都很高,因此,可收集這些場的產蛋高峰雞蛋若干,備用。
材料準備
製作卵黃抗體要事先準備好相關材料,如500ml鹽水瓶、250ml疫苗瓶、50ml離心管、4℃離心機、礦泉水瓶、燒杯、PH試紙、1mol/L鹽酸、雙抗等,器皿使用前都要高壓。
分離蛋清和蛋黃
製作卵黃抗體只需要蛋黃,要將蛋清去除。
雞蛋消毒後,將蛋打碎入盤,只需要用一個礦泉水瓶,將蛋黃吸入瓶內,這樣蛋黃和蛋清就分開了,很簡單。
攪拌混勻、稀釋
將蛋黃放入中號燒杯內,用玻璃棒攪拌混勻,然後用50ml注射器吸取50ml蛋黃,注入已事先裝有450ml純化水的鹽水瓶中,再混勻,這樣蛋黃就做了10倍稀釋(稀釋倍數視卵黃抗體水平而定)。
調PH
用PH試紙(有條件的用精密PH計)和1mol/L鹽酸調節卵黃溶液的PH至5.0,混勻,調節完畢後4℃冰箱靜置4h。
離心取上清
卵黃溶液靜置後會分層,取上清液倒入50ml離心管內,4℃,6000r/min離心25min,卵黃抗體(主要為IgG)就存在於上清液中了。
測定每瓶的抗體效價
每瓶混勻後取1ml,常規方法檢測ND的HI抗體效價(詳見本小編“怎樣操作HI試驗測定血清抗體”),將效價較低的棄去。
分裝
配置好的卵黃抗體要分裝到250ml常用疫苗瓶內,便於保存和運輸, 一般2-8℃保存即可。
注意事項
稀釋倍數視卵黃抗體水平而定。
本法使用酸化法制作卵黃抗體。
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