農桿菌侵染菸草?

轉基因植物培育方法。以重組質粒轉入農桿菌,然後用農桿菌侵染菸草葉片,從而獲得目的轉基因菸草。

工具/原料

無菌苗,重組質粒,農桿菌,共培養基,ms0等

酒精燈,鑷子,剪刀

方法/步驟

將重組質粒轉入農桿菌,然後將農桿菌擴大培養,獲取OD約為0.8的菌液。

將菌液移入離心管,離心,獲得菌體。去上清,用MS0清洗3邊,最後用MS0重懸,測OD,控制在0.4左右。

重懸液中加入20mg/ml AS

將菸草葉片去邊緣和主脈,剪成均勻大小。放入農桿菌中侵染約8min

晾乾,然後放入共培養基中黑暗培育三天,轉入S1約三週,再轉入S2約2周,轉入S3中讓小苗生根即可。

注意事項

全過程為無菌操作。

注意周圍雜菌汙染。

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