轉基因植物培育方法。以重組質粒轉入農桿菌,然後用農桿菌侵染菸草葉片,從而獲得目的轉基因菸草。
工具/原料
無菌苗,重組質粒,農桿菌,共培養基,ms0等
酒精燈,鑷子,剪刀
方法/步驟
將重組質粒轉入農桿菌,然後將農桿菌擴大培養,獲取OD約為0.8的菌液。
將菌液移入離心管,離心,獲得菌體。去上清,用MS0清洗3邊,最後用MS0重懸,測OD,控制在0.4左右。
重懸液中加入20mg/ml AS
將菸草葉片去邊緣和主脈,剪成均勻大小。放入農桿菌中侵染約8min
晾乾,然後放入共培養基中黑暗培育三天,轉入S1約三週,再轉入S2約2周,轉入S3中讓小苗生根即可。
注意事項
全過程為無菌操作。
注意周圍雜菌汙染。