生物實驗知識點

　　生物實驗教學是生物教學的重要組成部分。學生學習興趣的培養依賴生物實驗教學的有效落實和開展，只有讓學生通過親身參與生物實驗探究活動，才能掌握正確的科學方法和思維方式。下面小編給你分享，歡迎閱讀。

　　***一***

　　物質鑑定

　　還原糖 + 斐林試劑～磚紅色沉澱 脂 肪 + 蘇丹III ～橘黃色 脂 肪 + 蘇丹IV～ 紅色

　　蛋白質 + 雙縮脲試劑 ～紫色反應

　　1、還原糖的檢測

　　***1***材料的選取：還原糖含量高，白色或近於白色，如蘋果，梨，白蘿蔔。

　　***2***試劑：斐林試劑***甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液***，現配現用。 ***3***步驟：取樣液2mL於試管中→加入剛配的斐林試劑1mL***斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻後再加入***→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化***白色→淺藍色→磚紅色***

　　2、脂肪的檢測

　　***1***材料的選取：含脂肪量越高的組織越好，如花生的子葉。

　　***2***步驟： 製作切片***切片越薄越好***將最薄的花生切片放在載玻片中央 ↓

　　染色***滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min後吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多餘的酒精*** ↓

　　製作裝片***滴1～2滴清水於材料切片上→蓋上蓋玻片*** ↓

　　鏡檢鑑定***顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒***

　　3、蛋白質的檢測

　　***1***試劑：雙縮脲試劑***A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液*** ***2***步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀察顏色變化***紫色*** 考點提示：

　　***1***常見還原性糖與非還原性糖有哪些?

　　葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;澱粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。

　　***2 ***還原性糖植物組織取材條件?

　　含糖量較高、顏色為白色或近於白色，如：蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿蔔等。

　　***3***研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響?

　　加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少，使鑑定時溶液顏色變化不明顯。

　　***4***斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?

　　為何要現混現用? 混合後使用;產生氫氧化銅;氫氧化銅不穩定。

　　***5***還原性糖中加入斐林試劑後，溶液顏色變化的順序為： 淺藍色 棕色 磚紅色 ***6***花生種子切片為何要薄? 只有很薄的切片，才能透光，而用於顯微鏡的觀察。

　　***7***轉動細準焦螺旋時，若花生切片的細胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什麼? 切片的厚薄不均勻。

　　***8***脂肪鑑定中乙醇作用? 洗去浮色。

　　***9***雙縮脲試劑A、B兩液是否混合後用?先加A液的目的。怎樣通過對比看顏色變化? 不能混合;先加A液的目的是使溶液呈鹼性;先留出一些大豆組織樣液做對比。

　　***二***

　　觀察葉綠體和細胞質流動

　　1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細胞臨時裝片

　　2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色,球形或橢球形。

　　用健那綠染液染色後的口腔上皮細胞中線粒體成藍綠色,細胞質接近無色。 知識概要：

　　取材 製片 低倍觀察 高倍觀察 考點提示：

　　***1***為什麼可直接取用蘚類的小葉，而不能直接取用菠菜葉?

　　因為蘚類的小葉很薄，只有一層細胞組成，而菠菜葉由很多層細胞構成。

　　***2***取用菠菜葉的下表皮時，為何要稍帶些葉肉?

　　表皮細胞除保衛細胞外，一般不含葉綠體，而葉肉細胞含較多的葉綠體。

　　***3***怎樣加快黑藻細胞質的流動速度?最適溫度是多少? 進行光照、提高水溫、切傷部分葉片;25℃左右。

　　***4***對黑藻什麼部位的細胞觀察，所觀察到的細胞質流動的現象最明顯?

　　葉脈附近的細胞。

　　***5***若視野中某細胞中細胞質的流動方向為順時針，則在裝片中該細胞的細胞質的實際流動方向是怎樣的?

　　仍為順時針。

　　***6***是否一般細胞的細胞質不流動，只有黑藻等少數植物的細胞質才流動? 否，活細胞的細胞質都是流動的。

　　***7***若觀察植物根毛細胞細胞質的流動，則對顯微鏡的視野亮度應如何調節?

　　視野應適當調暗一些，可用反光鏡的平面鏡來採光或縮小光圈。

　　***8***在強光照射下，葉綠體的向光面有何變化?葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。

　　***三***

　　觀察有絲分裂

　　1、 材料：洋蔥根尖***蔥，蒜***

　　2、 2、步驟：***一***洋蔥根尖的培養 ***二***裝片的製作

　　製作流程：解離→漂洗→染色→製片

　　1. 解離: 藥液: 質量分數為15%的鹽酸,體積分數為95%的酒精***1 : 1混合液***. 時間: 3~5min .目的: 使組織中的細胞相互分離開來.

　　2. 漂洗: 用清水漂洗約10min. 目的: 洗去藥液,防止解離過度,並有利於染色.

　　3. 染色: 用質量濃度為0.01g / mL或0.02g / mL的龍膽紫溶液***或醋酸洋紅液***染色3~ 5min 目的: 使染色體著色,利於觀察.

　　4. 製片: 將根尖放在載玻片上,加一滴清水,並用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片. 然後用拇指輕輕地按壓載玻片. 目的: 使細胞分散開來,有利於觀察. ***三***觀察

　　1、先在低倍鏡下找到根尖分生區細胞：細胞呈正方形，排列緊密,有的細胞正在分裂。 2、換高倍鏡下觀察：分裂中期→分裂前、後、末期→分裂間期。***注意各時期細胞內染色體形態和分佈的特點***。其中，處於分裂間期的細胞數目最多。 考點提示：

　　***1***培養根尖時，為何要經常換水?

　　增加水中的氧氣，防止根進行無氧呼吸造成根的腐爛。

　　***2***培養根尖時，應選用老洋蔥還是新洋蔥?為什麼?

　　應選用舊洋蔥，因為新洋蔥尚在休眠，不易生根。

　　***3***為何每條根只能用根尖?取根尖的最佳時間是何時?為何?

　　因為根尖分生區的細胞能進行有絲分裂;上午10時到下午2時;因為此時細胞分裂活躍。

　　***4***解離和壓片的目的分別是什麼?壓片時為何要再加一塊載玻片?

　　解離是為了使細胞相互分離開來，壓片是為了使細胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻，防止蓋玻片被壓破。

　　***5***若所觀察的組織細胞大多是破碎而不完整的，其原因是什麼?

　　壓片時用力過大。

　　***6***解離過程中鹽酸的作用是什麼?丙酮可代替嗎?

　　分解和溶解細胞間質;不能，而硝酸可代替。

　　***7***為何要漂洗?

　　洗去鹽酸便於染色。

　　***8***細胞中染色最深的結構是什麼?

　　染色最深的結構是染色質或染色體。

　　***9***若所觀察的細胞各部分全是紫色，其原因是什麼?

　　染液濃度過大或染色時間過長。

　　***10***為何要找分生區?分生區的特點是什麼?能用高倍物鏡找分生區嗎?為什麼?

　　因為在根尖只有分生區的細胞能夠進行細胞分裂;分生區的特點是：細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞處於分裂狀態;不能用高倍鏡找分生區，因為高倍鏡所觀察的實際範圍很小，難以發現分生區。

　　***11***分生區細胞中，什麼時期的細胞最多?為什麼?

　　間期;因為在細胞週期中，間期時間最長。

　　***12***所觀察的細胞能從中期變化到後期嗎?為什麼?

　　不能，因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。

　　***13***觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體?為什麼?

　　不能，因為洋蔥表皮細胞一般不分裂。

　　***14***若觀察時不能看到染色體，其原因是什麼?

　　沒有找到分生區細胞;沒有找到處於分裂期的細胞;染液過稀;染色時間過短。

　　***四***

　　色素的提取和分離

　　1、原理：葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素 各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素 2、步驟：

　　***1***提取色素 研磨 ***2***製備濾紙條

　　***3***畫濾液細線：均勻，直，細，重複若干次 ***幹了之後*** ***4***分離色素：不能讓濾液細線觸及層析液

　　***5***觀察和記錄: 結果濾紙條上從上到下依次為:橙黃色***胡蘿蔔素***、黃色***葉黃素***、藍綠色***葉綠素a***、黃綠色***葉綠素b***. 考點提示：

　　***1***對葉片的要求?為何要去掉葉柄和粗的時脈?

　　綠色、最好是深綠色。因為葉柄和葉脈中所含色素很少。

　　***2***二氧化矽的作用?不加二氧化矽對實驗有何影響?

　　為了使研磨充分。不加二氧化矽，會使濾液和色素帶的顏色變淺。

　　***3***丙酮的作用?它可用什麼來替代?用水能替代嗎?

　　溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替，但不能用水來代替，因為色素不溶於水。

　　***4***碳酸鈣的作用?不加碳酸鈣對實驗有何影響?

　　保護色素，防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會變成黃綠色或褐色。

　　***5***研磨為何要迅速?要充分?過濾時為何用布不用濾紙? 研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發;只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙，但能通過尼龍布。

　　***6***濾紙條為何要剪去兩角? 防止兩側層析液擴散過快。

　　***7***為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線? 因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素，會影響色素的分離結果。

　　***8*** 濾液細線為何要直?為何要重畫幾次?

　　防止色素帶的重疊;增加色素量，使色素帶的顏色更深一些。

　　***9*** 濾液細線為何不能觸到層析液?

　　防止色素溶解到層析液中。

　　***10***濾紙條上色素為何會分離?

　　由於不同的色素在層析液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的擴散速度就不同。

　　***11***色素帶最寬的是什麼色素?它在層析液中的溶解度比什麼色素大一些? 最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。

　　***12***濾紙條上相互間距最大的是哪兩種色素? 胡蘿蔔素和葉黃素。

　　***13***色素帶最窄的是第幾條色素帶?為何?

　　第一條色素帶，因為胡蘿蔔素在葉綠體的四種色素中含量最少。