加標回收率實驗怎麼做?

加標回收率實驗標準品溶液在什麼時候加入呢?

加標回收率是控制樣品前處理好壞的依據，應該在樣品處理前加入。相同的樣品取兩份，其中一份加入定量的待測成分標準物質，兩份同時按相同的分析步驟分析。加標回收率=(加標樣品的結果-未加標樣品)/加標理論值。

怎麼做回收率實驗？

回收率是驗證儀器穩定性的一個重要指標。進樣量與出來的峰面積的關係，儀器越穩定，回收率的範圍就越小，例如98%~102%，這樣的回收率就算比較不定了。比方說你進樣1ul，峰面積為1000（對照），實際上峰面積可能為995，999，1005等等。這個的回收率就是99.5% 99.9 % 100.5%。

什麼是加樣回收試驗？

加樣回收是用來考察你的方法學的,

假如加樣回收達不到要求,

說明你的方法學不可靠,

用該種方法來處理樣品會產生很大的誤差。

先看中國藥典(2005年版二部)附錄XIX A 藥品質量標準分析方法驗證指導原則中的一段話：

藥品質量標準分析方法驗證的目的是證實採用的方法適合於相應檢測要求。

在起草藥品質量標準時，分析方法需經驗證；

在藥物生產方法變更、製劑的組分變更、

原分析方法進行修訂時，則質量標準分析方法也需進行驗證。

方法驗證過程和結果均應記載在藥品標準起草或修訂說明中。

需驗證的分析項目有：

鑑別試驗，雜質定量或限度檢查，原料藥或製劑中有效成分含量測定，以及製劑中其他成分(如降解產物、防腐劑等)的測定。藥品溶出度、釋放度等功能檢查中，其溶出量等測試方法也應作必要驗證。

驗證內容有：

準確度、精密度(包括重複性、中間精密度和重現性)、專屬性、檢測限、定量限、線性、範圍和耐用性。視具體方法擬訂驗證的內容。附表中列出的分析項目和相應的驗證內容可供參考。

方法驗證內容如下

一、準確度

正確度係指用該方法測定的結果與真實值或參考值接近的程度，一般以回收率(%)表示。準確度應在規定的範圍內建立。

1．含量測定方法的準確度

原料藥可用已知純度的對照品或樣品進行測定，

或用本法所得結果與已建立準確度的另一方法測定的結果進行比較。

製劑可用含已知量被測物的各組分混合物進行測定。

如不能得到製劑的全部組分，

可向製劑中加入已知量的被測物進行測定，

或與另一個已建立準確度的方法比較結果。

如該法已建立了精密度、線性和專屬性，

準確度有時也能推算出來，不必再做。

2．雜質定量測定的準確度

可向原料藥或製劑中加入已知量雜質進行測定。

假如不能得到雜質或降解產物，

可用本法測定結果與另一成熟的方法進行比較，

如藥典標準方法或經過驗證的方法。如不能測得雜質或降解產物的相對響應因子，則可用原料藥的響應因子。

應明確證實單個雜質和雜質總量相當於主成分的重量比(%)，或是面積比(%)。

3．數據要求

在規定範圍內，至少用9次測定結果進行評價，

例如製備3個不同濃度的樣品，各測定3次。

應報告已知加入量的回收率(%)，或測定結果平均值與真實值之差及其可信限。

所以加樣回收率反映的是方法的準確度，

是評價方法好壞的指標這一，是誤差理論在藥物質量標準中的具體應用。

準確度=(測量值-真實值)/真實值*100%。

實際工作中，其實不存在藥物的真實值的

(我們所有的數據都是測量值，都是人們用一定的方法測出來的)。其他領域也一樣。

於是人們找一種比較可靠的得到的值規定為真實值。這就是加樣回收率的方法。

比如，為了評價阿司匹林片劑的含量測定方法，用天平稱一定量(如：100mg)的對照品，加入到阿司匹林的片劑輔料中，這一定量的對照品就是真實值。用建立的方法測出來是99mg，這個方法的準確度就是99%，或加樣回收率是99%，根據藥品的具體情況，當這個回收率達到一定範圍時(比如99%-101%)就認為方法是準確的。

參考資料