苯酚硫酸法測多糖含量?

苯酚硫酸法測多糖，苯酚硫酸怎麼配製

苯酚硫酸法測多糖，苯酚硫酸怎麼配製

在單因素試驗基礎上,選擇對多糖含量測定結果產生顯著影響的4個顯色因素:6％苯酚用量、濃硫酸用量、反應溫度、水浴顯色時間進行正交試驗,獲得傳統苯酚-硫酸法測定多糖含量的最佳顯色條件是1 mL 6％苯酚溶液、7 mL濃硫酸、4℃反應溫度、30 min水浴顯色.改進後的多糖含量測定的顯色條件即按照1:7的比例直接配製苯酚-硫酸顯色液,在4℃條件下加入樣品溶液,在90℃水浴進行30 min顯色後,於490 nm處測定吸光度,計算多糖含量.通過傳統最佳顯色方法的驗證試驗和改進後的顯色方法測定多糖含量的結果比較,表明改進後的方法具有操作簡便、精密度高、準確度高、實用性強的優勢.

求助各位大神，關於苯酚硫酸法測定多糖含量的問題

苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成單糖，並迅速脫水生成糖醛衍生物，然後與苯酚生成橙黃色化合物，接著用紫外分光光度計選擇490nm測量吸光度。但是蛋白質無以上性質，應該不影響吧。僅供參考。

苯酚硫酸法測定多糖需要注意哪些問題

苯酚硫酸法測定多糖需要注意哪些問題

原理

多糖在硫酸的作用下先水解成單糖,並迅速脫水生成糖醛衍生物,然後與苯酚生成橙黃色化合物.再以比色法測定.

試劑

1． 濃硫酸：分析純,95.5%

2． 80%苯酚：80克苯酚（分析純重蒸餾試劑）加20克水使之溶解,可置冰箱中避光長期儲存.

3． 6%苯酚：臨用前以80%苯酚配製.（每次測定均需現配）

4． 標準葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析純葡萄糖.

5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解,可置冰箱中長期儲存.

6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解,可置冰箱中長期儲存.

7． 6mol/L 氫氧化鈉：120克分析純氫氧化鈉溶於500ml水.

8． 6mol/L 鹽酸