如何檢測沙門氏菌:[1]腸道致病菌檢測:[2]?

一、沙門氏菌

沙門氏菌(學名:Salmonella),屬腸桿菌科,是一種革蘭氏陰性菌。已發現近千種(或菌株)。按其抗原成分,可分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。其中與人體疾病有關的主要有甲組的甲型副傷寒桿菌,乙組的乙型副傷寒桿菌和鼠傷寒桿菌,丙組的丙型副傷寒桿菌和豬霍亂桿菌,丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。除傷寒桿菌、甲型副傷寒桿菌和乙型副傷寒桿菌引起人類的疾病外,大多數僅能引起家畜、鼠類和禽類等動物的疾病,但有時也可汙染人類的食物而引起食物中毒。

感染沙門氏菌的人或帶菌者的糞便汙染食品,可使人發生食物中毒。據統計在世界各國的種類細菌性食物中毒中,沙門氏菌引起的食物中毒常列榜首。中國內陸地區也以沙門氏菌為首位。

沙門氏菌中毒的症狀主要由急性腸胃炎為主,潛伏期一般為四至四十八小時,短期是數小時,長期是兩天至三天,前期症狀有噁心、頭疼,全身乏力和發冷等,主要症狀有嘔吐、腹瀉、腹疼,糞便以黃綠色水樣便,有時帶膿血和黏液,一般發熱的溫度在三十八攝氏度至四十攝氏度,重病人出現打寒戰、驚厥、抽搐和昏迷的症狀。病程為三天至七天,一般預後良好,但是老人、兒童和體弱者如不及時進行急救處理也可導致死亡,多數沙門氏菌病患者不需服藥即可自愈,嬰兒、老人及那些已患有某些疾病的患者應就醫治療,沙門氏菌攜帶者不可從事準備食物的工作,直到獲得醫生的許可。

二、沙門氏菌檢測方法

1.細菌培養法

沙門氏菌為需氧及兼性厭氧菌。在普通瓊脂培養基上生長良好,培養24h後,形成中等大小、圓形、表面光滑、無色半透明、邊緣整齊的菌落,其菌落特徵亦與大腸桿菌相似(無糞臭味)。

1)鑑別培養基(麥康凱、SS、伊紅美藍):一般無色菌落。

2)三糖鐵瓊脂斜面:斜面為紅色,底部變黑併產氣。

2.生化鑑定

沙門氏菌生化反應很活躍,能分解多種糖類和醇。

1)發酵葡萄糖,麥芽糖,甘露醇和山梨醇產氣;

2)不發酵乳糖、蔗糖和側金盞花醇;

3)不產吲哚、V-P反應陰性;

4)不水解尿素和對苯丙氨酸不脫氨。

傷寒沙門氏菌、雞傷寒沙門氏菌及一部分雞白痢沙門氏菌發酵糖不產氣,大多數雞白痢沙門氏菌不發酵麥芽糖;除雞白痢沙門氏菌、豬傷寒沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌和仙台沙門氏菌等外,均能利用枸櫞酸鹽。

3.血清凝集法

沙門氏菌的抗原分為菌體抗原(O)、鞭毛抗原(H)、莢膜抗原(K、Vi)三種。菌體抗原(O)─分群;鞭毛抗原(H)─分型;毒力抗原(Vi)─微莢膜成分。

1)O抗原

細胞壁表面的耐熱多糖抗原;

根據O抗原分為:A、B、C1-C4、D1-D3、E1-E4、F、G1-G2、H……Z和O51-O63以及O65-O67計51個O群,包括58種O抗原。

2)H抗原

蛋白質性鞭毛抗原,計有63種;

同一O群沙門氏菌根據H抗原的不同可分成不同的血清型。

3)Vi抗原

為微莢膜成分;相當於K抗原,與毒力(virulence)有關,故稱為Vi抗原;

其抗原性弱,刺激機體產生短暫低效價抗體, 伴隨活菌一起存在.測定Vi抗體有助於檢出帶菌者新分離的菌株多有Vi抗原,但在普通培養基上多次傳代後易丟失此抗原,這種變異稱為“V-W變異”。

4)血清型

以O:H:Vi形式表示

目前本菌屬至少已有2300個血清型。對人和溫血動物致病的血清型絕大多數分屬於A—F群;在疾病中經常出現的不足50種。

關於血清凝集法檢測,推薦天津生物芯片公司生產的沙門氏菌診斷血清。

4.核酸擴增法

核酸擴增技術,即聚合酶鏈式反應(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是設計、合成兩條寡核苷酸,作為引物,對應於待測病原微生物某一段特異性序列的兩端,然後在體外模擬DNA體內複製的過程反覆擴增,使靶序列放大上萬倍甚至上百萬倍而被檢測出來。

如何檢測沙門氏菌:[1]腸道致病菌檢測 (共1篇)

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