HA-HI試驗是測定具有血凝病毒抗體的常用方法，是養殖業化驗室人員必須掌握的試驗技能。操作HI試驗需要使用四單位抗原，配置完成後還需進行驗證以保證試驗的準確性，那麼該如何進行驗證呢？下面是小編的詳細操作示範。
工具/原料
HA-HI，四單位抗原
PBS緩衝液，抗原，移液器及吸頭，96孔血凝板，1%雞紅細胞等
方法/步驟
測定抗原的血凝價（HA）
進行HI試驗之前首先要進行HA試驗，以測定抗原的血凝價，關於具體的試驗操作請參照小編的“血凝HA試驗操作攻略”，此處不贅述。
配置四單位抗原
HI試驗要用“四單位抗原”進行試驗，如何配置四單位抗原呢？舉例說明，比如測定的抗原血凝價為2的9次方，需要10ml的四單位抗原，那麼所需抗原原液的體積計算公式為：抗原原液*（2的7次方）=10ml，也就是說將抗原進行2的7次方稀釋。
計算出抗原原液用量，再計算所需PBS稀釋液的體積。詳細請參考本小編“怎樣配置HA-HI試驗用四單位抗原”。
按比例稀釋
取6個1.5mlEP管，分別加入100微升、200微升、300微升、400微升、500微升、600微升PBS緩衝液，然後每管均加入100微升配置好的四單位抗原，充分混勻，備用。
PBS鋪板
將移液器調至25微升，取96孔板一個，每孔各加25微升PBS鋪底。
加稀釋過的抗原
將按比例稀釋過的抗原（1:1、1:2至1:6）依次加入96孔板的第一排內前6孔，重複四次（也就是使用96孔板的前四排）。
加1%雞紅細胞
抗原加入完畢後，最後一步將板子的前四排、每排前6孔分別加入25微升1%雞紅細胞，第5排僅加紅細胞作為試驗對照，置於25℃反應20min。
結果讀取
作用20min後取出板子，讀取結果。如果第5排紅細胞對照全部流下來說明對照成立。
試驗前4排孔中，每排第1孔、第2孔、第3孔完全凝集，而第4孔、第5孔、第6孔部分凝集甚至不凝集，則說明四單位驗證成功，可以進行下一步試驗，否則需要調整抗原或者稀釋用PBS的體積。
注意事項
四單位的驗證非常關鍵，四單位配置的好壞直接影響到試驗的最終結果，如有不明白的朋友可以給我留言。
覺得實用投個票唄，謝謝啦。