基因檢測技術論文

　　基因是DNA分子上的一個功能片段，是遺傳資訊的基本單位，是決定一切生物物種最基本的因子;下面是小編整理了，有興趣的親可以來閱讀一下!

　　篇一

　　病毒基因的檢測

　　【關鍵詞】 病毒基因 檢測

　　一 乙型肝炎病毒DNA***HBV-DNA***測定

　　乙型肝炎是由乙肝病毒引起的以肝臟損害為主要臨床特徵的急、慢性傳染病，嚴重者可 發展成慢性肝炎、肝硬化和肝癌。在我國，乙肝是危害人類健康的一種主要傳染病。

　　【 參考值】

　　陰性 ***Taqman熒光定量PCR技術***

　　【臨床意義】

　　1.HBV-DNA是乙型肝炎病毒感染的直接證據，是HBV有活性複製能力及具傳染性的確切標誌。

　　2.可定量檢測HBV-DNA含量，為臨床病情判斷、療效觀察提供資訊。

　　3.HBV-DNA的出現先於其他血清學指標***如HBsAg***，可早期診斷HBV感染。

　　4.正常人HBV-DNA為陰性。當HBV-DNA為101～104拷貝/ml時，表明病毒複製水平低，傳染性較弱;而當 HBV-DNA>104拷貝/ml時，表明病毒複製水平高，傳染性強。

　　5.HBV-DNA含量測定可為臨床藥物選擇提供依據。

　　【注意事項】

　　1.標本可用血清或血漿，避免肝素抗凝，避免反覆凍融。

　　2.標本室溫放置不超過4小時。

　　3.溶血、高膽紅素標本影響檢測結果。

　　二 其他病毒DNA測定

　　***一***人乳頭瘤病毒DNA***HPV-DNA***檢查

　　人乳頭瘤病毒是一種小的雙鏈DNA病毒，根據核酸相關性分型已發現70餘型。該病毒可以感染人的面板和黏摸上皮細胞，誘發細胞增生，產生乳頭瘤樣病變。

　　【參考值】

　　陰性 ***多重核酸熒光定量PCR技術***

　　【臨床意義】

　　1.HPV難以用傳統的病毒培養及血清學技術檢測，目前主要採用分子生物技術檢測HPV-DNA，靈敏度高。

　　2.可對尿道、陰道、宮頸脫落細胞進行人乳頭瘤病毒的檢測及分型，判斷體內HPV感染狀況。

　　3.HPV 6和11型與尖銳溼疣、喉頭鱗狀上皮乳頭狀瘤發生有關;HPV 16、18、31、32型等與宮頸癌發生相關。因此，可用於對HPV高危亞型的診斷，對尖銳溼疣、宮頸癌等疾病的診斷與篩查具有重要意義。

　　4.HPV-DNA檢測可用於考核療效與預後。

　　【注意事項】

　　1.用無菌拭子取尿道、陰道、宮頸分泌物於無菌試管或無菌瓶中。

　　2.標本採集應嚴格按無菌操作，避免汙染。並及時送檢。

　　***二***人類鉅細胞病毒DNA***HCMV-DNA***檢查

　　HCMV是皰疹病毒科成員，人類普遍易感，多為隱性或潛伏感染。在免疫功能低下、缺陷或抑制情況下，可發生成人HCMV感染，常呈瀰漫性病變，嚴重者甚至死亡。

　　【參考值】

　　陰性 ***熒光探針雜交PCR技術***

　　【臨床意義】

　　1.用於臨床HCMV感染的快速診斷。

　　2.用於臨床免疫抑制 治療過程中體內HCMV感染的快速診斷與療效監測。獲得性免疫缺陷綜合徵等患者HCMV感染的診斷與療效監測。

　　3.PCR技術檢測HCMV的敏感性高，且HCMV-DNA的出現早於臨床症狀或血清學標記物的出現，可早期診斷 HCMV感染。

　　4.妊娠早期感染HCMV可引起胎兒先天畸形，產前檢測HCMV-DNA有利於優生優育。

　　5.連續監測鉅細胞病毒的含量變化可瞭解病毒的複製狀況，從而為疾病的早期診斷與藥物療效提供直接的病原學依據。

　　【注意事項】

　　採用EDTA抗凝全血或腦脊液標本，採集後及時送檢。

　　***三***單純皰疹病毒DNA***simplex herpes virus， HSV-DNA***

　　單純皰疹病毒是一種有囊膜的雙股DNA病毒，分為I型和II型。近年來，HSV是性傳播疾病、病毒性腦炎等疾病的重要病原體。

　　【參考值】

　　陰性 ***熒光探針PCR技術***

　　【臨床意義】

　　1.用於檢測人血清樣本或體液樣本中的單純皰疹病毒並可同時分型，輔助診斷HSV感染性疾病。

　　2.HSV I型感染主要引起口脣皰疹、皰疹性結膜炎、腦炎和面板性皰疹，HSV II型主要引起生殖器皰疹， HSV-DNA檢測可輔助診斷上述疾病，並可用於考核療效與預後。 【注意事項】

　　1.血清用無菌注射針頭抽取靜脈血2ml於無菌肝功管中。

　　2.分泌物用無菌棉拭子採集標本，女性取宮頸或陰道分泌物，男性取精液或前列腺液，將取樣後的棉拭子放入無菌試管或無菌瓶中。

　　3.腦脊液抽取腦脊液於無菌玻璃瓶中。

　　***四***EB病毒DNA***EB virus，EBV-DNA***

　　EBV屬於丫皰疹病毒科，主要經涎液傳播，PCR技術可靈敏地檢測出標本中的EBV-DNA，滿足臨床診斷、 治療需要。

　　【 參考值】

　　陰性 ***熒光探針雜交PCR技術***

　　【臨床意義】

　　1.可快速檢測血液、腦脊液、組織、尿液中的EB病毒，為EB病毒感染提供直接證據。

　　2.EB病毒臨床上與鼻咽癌傳染性單核細胞增多症、霍奇金病等的發病密切相關。

　　【注意事項】

　　1.檢測標本可採用EDTA抗凝全血、腦脊液、咽拭子、尿液、病變組織等。

　　2.標本採集時嚴格按無菌操作，並及時送檢。

　　三 RNA病毒測定

　　丙型肝炎病毒RNA***HCV-RNA***檢測

　　丙型肝炎病毒是一種單鏈正股RNA病毒，引起丙型病毒性肝炎。丙型病毒性肝炎多因輸血或血製品而引起，在輸血者中還存在無症狀的HCV攜帶者。

　　【參考值】

　　陰性***RT-PCR，熒光定量PCR技術***

　　【臨床意義】

　　1.有助於HCV感染的早期診斷。

　　2.HCV-RNA陽性提示HCV複製活躍，傳染性強。

　　3.HCV-RNA轉陰提示HCV複製受抑，預後較好。

　　4.連續觀察HCV-RNA，結合抗-HCV的動態變化，可作為丙肝的預後判斷和干擾素等藥物療效的評價指標。

　　【注意事項】

　　1.標本可用血清或血漿，用無菌注射針頭抽取靜脈血2～3ml於無菌肝功管或EDTA抗凝管中送檢。避免肝素抗凝，避免反覆凍融。

　　2.標本室溫放置不超過4小時。

　　3.溶血、高膽紅素標本影響檢測結果。

　　參 考 文 獻

　　[1]楊振,祁自柏,李河民.病毒基因檢測技術的 發展趨勢. 《 中國生物製品學雜誌》,2006年01期.

　　[2]徐麗.利用基因工程進行PHB相關基因的克隆和菸草轉化[D].山東師範大學,2000年.

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