基因重組蛋白?

General 更新 2024-11-25

蛋白質重組和基因重組有什麼差別

蛋白質重組,先要全部水解為氨基酸,蛋白質的種類多就是因為它的數量大,結構複雜,空間結構千變萬化。而基本的氨基酸只有20中,所以它重組以後就可能變成完全不同的東西,控制和以前完全無關的代謝過程。

基因重組只是控制同一性狀表達不同而已,但是它不會改變性狀的基本情況。如:控制眼睛顏色的基因,親本的基因重組之後可能親本為黑色,子代便為藍色。但絕叮不會控制眼睛顏色的基因在重組之後就變成控制耳朵的基因。

重組疫苗和基因疫苗(核酸疫苗)的區別是什麼?

重組疫苗是應用基因工程技術製成,如把編碼HBSAg基因插入酵母菌基因組,製成基因重組乙肝疫苗。

重組疫苗:通過基因重組技術生產的疫苗

DNA疫苗:通過導入外源DNA表達蛋白的疫苗基因疫苗將編碼外源性抗原的基因插入到含真核表達系統的載體上,然後直接導入人或動物體內,讓其在宿主細胞中表達抗原蛋白,該抗原蛋白可直接誘導機體產生免疫應答。抗原基因在一定時限內的持續表達,不斷刺激機體免疫系統產生應答

DNA疫苗:通過導入外源DNA表達蛋白的疫苗

重組蛋白用的是dna還是rna

都可以。

重組蛋白的產生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質。重組蛋白質在製藥工業上主要是指表達獲得的細胞因子、凝血因子或者人工設計的蛋白分子。

重組蛋白和天然蛋白有什麼區別

重組蛋白一般用轉基因動物的乳腺產生,產生的重組蛋白作為生物製藥在醫學中作用顯著。利用基因工程技術,可以使哺乳動物本身變成“批量生產藥物的工廠”。方法是將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起,通過顯微注射等方法,導入哺乳動物(哺乳動物才會泌乳)的受精卵中,然後,將受精卵送入母體內,使其生長髮育成轉基因動物。轉基因動物進入泌乳期後,可以通過分泌的乳汁來生產所需要的蛋白質藥品,因而稱為動物乳腺生物反應器或乳房生物反應器。目前,科學家已在牛和山羊等動物的乳腺生物反應器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素和α-抗胰蛋白酶等重要的醫藥產品。

什麼是融合蛋白

基本簡介

融合蛋白有兩種不同的含義,一種是通過DNA重組技術得到的兩個基因重組後的表達產物。另一種含義就是介導兩個細胞質膜融合的一組蛋白,如在仙台病毒脂雙層外側小葉中含有的兩種糖蛋白之一,介導病毒被膜與宿主細胞質膜的融合作用。另一種糖蛋白是血細胞凝集素神經酰胺酶。

兩個不同的蛋白質連成一個大分子。可以通過化學方法連接,也可通過基因的融合來實現。在基因操作中,對一些分子數小的多肽基因常採用融合的方法與某一基因(如lac)相連,二者之間接上某一酶(如凝血酶)的切口,以增加在體內表達後產物的穩定性,也有的故意使兩個分子串連融合以提高療效,如IL-3與GM-CSF。也有與分泌性蛋白的信號肽基因組成融合基因,以使表達產物分泌到膜外或胞外。

在基因工程迅速發展的基礎上,有目的地把兩段或多段編碼功能蛋白的基因連接在一起,進而表達所需蛋白,這種通過在人工條件下將兩個或多個基因的編碼區首尾連接,由同一調控序列控制構成的基因表達後所得的蛋白質產物稱為融合蛋白。

摺疊編輯本段相關技術

摺疊技術特點

融合基因可在原核細胞(如大腸桿菌) 也可在真核細胞中進行表達。原核表達系統的特點是時程短,費用低,是科研中的主要工具。其缺點是真核蛋白表達沒有得到確切修飾;大量蛋 白常常沉澱成不溶性包涵體聚合物,需要複雜的變性和復性過程;大量蛋白的分泌較困難。真核表達系統的特點是蛋白翻譯後加工機會多,甚至可被改造成人源型;真核細胞易被轉染,具有遺傳穩定性和可重複性;產物可被分泌,提純簡單,成本低。

摺疊技術內容

1.進行目的基因的克隆:根據基因序列互補原則 ,設計合適的引物序列,以cDNA為模板,利用PCR技術擴增不同的目的DNA片段。

2.在載體中進行重組:通過限制內切酶將兩個DNA片段進行酶切並回收,然後通過連接酶將兩個具有相同末端酶切位點的基因片段進行體外連接,並克隆到高表達質粒載體中,構建重組質粒。

3.將重組表達載體轉染宿主細胞並利用選擇標誌進行篩選及測序。

4.融合基因的誘導表達及表達蛋白的純化 。

摺疊技術關鍵

在構建融合蛋白中,一個關鍵的問題是兩蛋白間的接頭序列,即連接肽。它的長度對蛋白質的摺疊和穩定性非常重要。如果接頭序列太短,可能影響兩蛋白高級結構的摺疊,從而相互干擾;如果接頭序列太長,又涉及免疫原性的問題,因為接頭序列本身就是新的抗原。

一般來說,3-5 個氨基酸的Linker 可滿足大部分融合蛋白的正確摺疊的要求。 有人嘗試在融合蛋白間加入一段有疏水性和一定伸展性的較長肽鏈,如(Gly4Ser1),目的是將兩者分開,以緩解相互干擾作用, 並獲得了滿意的結果。 但具體涉及到每種蛋白時,需具體分析。當我們構建融合蛋白時,應多選擇幾種融合方式, 從中優化出理想的連接方式。另外,大量研究表明連接肽的柔性和疏水性對不擾亂蛋白質的功能結構域是十分重要的。遺憾的是,目前對於連接肽序列的設計還沒有可靠的選擇標準。現在,大多數連接肽序列的設計和選擇仍主要依賴於直覺。儘管依賴於蛋白質的一級結構來預測其二級結構已經產生了重大的進步,但是我們對於序列和結構之間的關係的瞭解還是很有限的。

摺疊編輯本段臨床應用

摺疊DNA疫苗

目前,疫苗已經經歷了三代:第一代疫苗是用減毒或殺死的病原體來激活機體免疫系統;第二代疫苗是用生物技術和重組DNA技術研製的組分疫苗注射機體誘導免疫應答; 第三代疫苗是直接注射基因重組的抗原基 因來激活人體免疫系統,即DNA疫苗。DNA疫苗與傳統疫苗相比有著明顯的優勢,如易於生產,穩定性強,成本低廉等,並可同時誘導體液與細胞免疫應答。

目前利用基......

需將目的基因與乳腺蛋白基因的什麼等調控組件重組在一起

(1)在基因工程中需要大量目的基因,常見的獲取大量目的基因的方法是____。將目的基因導入奶牛受精卵最為有效的方法是____。導入前,需要將目的基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起,這一步驟屬於基因工程“四步曲”中的____。基因工程的受體細胞如果是單子葉植物細胞,導入目的基因常見的方法是____。

(2)細胞工程和胚胎工程在動物培養過程中有著廣泛的應用,試管牛、克隆牛培育過程中,前者特有的技術是____,後者特有的技術是____。若需迅速得到大量優良奶牛,可進行超數排卵技術處理,其措施是對供體母牛注射____,還可將早期胚胎分割,選擇發育至桑椹胚或囊胚階段的胚胎進行操作,對囊胚期胚胎進行分割時必須注意要將早期胚胎中的____均等分割。

試題答案

(1)PCR技術 顯微注射法 基因表達載體的構建 基因槍法(或花粉管通道法)

(2)體外受精 體細胞核移植 促性腺激素 內細胞團

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