液相色譜柱氨基柱介紹和使用?

氨基柱-XB-NH2液相色譜柱,其固定相是以超純全多孔球形矽膠為基質,通過採用獨有的固定相鍵合技術,使用含有氨基丙基官能團的有機矽烷鍵合而成,能比矽膠柱更快達到平衡,對流動相的水含量沒有矽膠柱敏感。

XB- NH2適用於大多數正相色譜的應用,還可作為HILIC親水作用色譜的固定相,可用於極性化合物的正相分析,弱陰離子交換以及含水的反相液相分析。XB- NH2色譜柱被廣泛應用於木糖、乳糖、葡萄糖等糖類的反相分析模式中。碳水化合物和糖類物質,可以在Ultimate? XB- NH2色譜柱上採用反相模式進行分析。

方法/步驟

新柱活化

正相使用

用異丙醇以0.5mL/min流速沖洗2h,再使用正相流動相進行平衡和測試。

反相使用

用異丙醇以0.5mL/min流速過渡2h,再用甲醇或乙腈沖洗30min以過渡到反相模式。然後再更換成流動相

進行平衡。

日常維護

正相條件

正相條件下,可以直接採用流動相平衡系統,使用後用異丙醇以0.5ml/min流速反向沖洗60min,最後儲存

在異丙醇中,正向使用;

反相使用

反相條件下使用,先用異丙醇以0.5mL/min流速過渡60min,再用甲醇或乙腈沖洗色譜柱30min以過渡到反

相模式。然後再更換成流動相進行平衡如果流動相中有緩衝鹽,使用前用採用流動相同等比例的有機相

和水相進行過渡,但水相中不含緩衝鹽。過渡30min後再換成流動相進行平衡色譜柱;

反向條件儲存方法:

流動相中如含有緩衝鹽,則先用過渡流動相以1ml/min反向沖洗45min,去除緩衝眼,用10%水90%有機溶

劑(甲醇或乙腈)沖洗45min,儲存在90%的有機相中。

注意事項

正相條件 正相使用時,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用於還原糖的分析

反相條件 pH值越低越有發生水解的危險,所以要嚴格控制pH範圍,使其pH範圍在2.0~8.0,通常建議使用範圍 pH3.0~7.0比較合適;

流動相中水相比例越高越有發生水解的危險,所以應儘量減少水在氨基柱上的保留,建議水相使用比例

短時間內,氨基柱可儲存在純甲醇,乙腈或異丙醇中,若長時間不使用建議儲存在異丙醇和正己烷試劑 中封存

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