磷的檢測
工具/原料
紫外可見分光光度計
方法/步驟
一．適用範圍：
本方法適用於配合飼料和單一飼料。
二．原理：
將試樣中的有機物破壞，使磷遊離出來，在酸性溶液中，用釩鉬酸銨處理，生成黃色的磷釩鉬酸銨【（NH₄）₃PO₄NH₄VO₄-16MoO₃】，在波長420nm下進行比色測定。
二．試劑與溶液：
本方法所用試劑除特殊說明外，均為分析純。水為蒸餾水或同等純度的水。
1. 鹽酸溶液：1:1水溶液
2. 硝酸。
3. 高氯酸。
4. 釩鉬酸銨顯色劑：稱取偏釩酸銨1.25g，加水200ml加熱溶解，加硝酸250ml，另稱取鉬酸銨25g，加水400ml加熱溶解，在冷卻的條件下，將兩種溶液混合，倒入1000ml容量瓶，定容，再倒入棕色磨口瓶避光保存，若生成沉澱則不能繼續使用。
5. 磷標準液：將磷酸二氫鉀在105℃乾燥1小時，在乾燥器中冷卻後稱取0.2195g置於小燒杯中，加入適量水溶解後，加硝酸3ml，轉移至1000ml容量瓶中定容，搖勻，即為50μg/ml的磷標準液。
四．儀器與設備：
1.實驗室用樣品粉碎機或研鉢。
2.分樣篩：孔徑0.45mm（40目）。
3.分析天平：分度值0.0001g。
4.高溫爐：可控制爐溫在550±20℃。
5.坩堝：瓷質，定容50ml。
6.凱式燒瓶：150ml。
7.可調小電爐：1000w。
8.容量瓶：100ml、50ml。
9.移液管：1ml、2ml、3ml、5ml、10ml。
10.分光光度計：10mm比色皿，可在420nm波長下測定吸光度。
11.量杯;10ml、20ml。
五．試樣的選取和製備：
取具有代表性的試樣，用四分法縮減至50g，粉碎至40目。
一． 測定步驟：
1. 試驗的分解：
⑴． 幹法：用於有機物質。稱取2.5g試樣，準確至0.0002g，在電爐上小火炭化，在炭化過程中，應將試樣在低溫狀態加熱灼燒至無煙，再放入高溫爐中於550±20℃下灼燒3小時，取出，在空氣中冷卻後，加入1:3的鹽酸10ml和濃硝酸4滴，小火煮沸10分鐘，冷卻後將此溶液轉入100ml容量瓶，定容，即為試樣分解液。
⑵． 溼法：用於無機物質。精確稱取磷酸氫鈣0.4g，其它試樣稱取1.0g於凱式燒瓶中，精確至0.0002g，加入濃硝酸10ml，高氯酸10ml，蓋上彎頸漏斗，加熱煮沸10分鐘，冷卻後加蒸餾水20ml，煮沸5分鐘，驅逐二氧化氮，冷卻後轉入容量瓶，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，即為試樣分解液。
2. 標準曲線的繪製：準確移取磷標準液0、1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0、13.0ml於50ml容量瓶中，各加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10分鐘，以0ml溶液為參比，用10ml比色皿，在420nm波長下，用分光光度計測定各溶液的濃度（或吸光度），打印機會打印出一條迴歸曲線的截距N和斜率M，以及相關係數R，（或以磷含量為橫座標，吸光度為縱座標繪製標準曲線）。
3. 試樣的測定：
準確移取試樣分解液1ml於50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，按六、2方法顯色和比色測定。測得試樣分解液的濃度值（或吸光度值），直接代入公式計算（或用標準曲線查的試樣分解液的含磷量後代入公式計算）。
七、測定結果的計算和表達：
1.計算：
P（%）=(C- C₁)/2m
式中：C—試樣分解液的濃度值。
C₁--空白溶液的濃度值。
m—試樣的質量。
或：P%=X/100Mv
式中：m—試樣的質量，g。
X—由標準曲線查得試樣分解液總磷含量（μg）。
V—移取試樣分解液體積（ml）。
2.允許差：
每個試樣稱取兩個平行樣進行測定，以其算術平均值為測定結果。磷含量小於0.5%時，允許相對偏差為10%，磷含量大於0.5%時，允許相對偏差為3%。